Development of metformin HCl granules using brown flaxseed mucilage as a retardant polymer: effects of polymer and drug ratio

Abstract Flaxseed (Linum usitatissimum L.) is the seed of a multipurpose plant of pharmaceutical interest, as its mucilage can be used as a natural matrix to develop extended-release dosage forms and potentially replace synthetic polymers. In this study, a 3² factorial design with two replicates of the central point was applied to optimize the development of extended-release granules of metformin HCl. The total fiber content of the mucilage as well as the friability and dissolution of the formulations were evaluated. The lyophilized mucilage presented a high total fiber content (42.63%), which suggests a high efficiency extraction process. Higher concentrations of the mucilage and metformin HCl yielded less friable granules. In addition, lower concentrations of metformin HCl and higher concentrations of the mucilage resulted in slower drug release during the dissolution assays. The release kinetics for most formulations were better represented by the Hixson-Crowell model, while formulations containing a higher concentration of the mucilage were represented by the Korsmeyer-Peppas model. Nonetheless, five formulations showed a longer release than the reference HPMC formulation. More desirable results were obtained with a higher concentration of the mucilage (13-18%) and a lower concentration of metformin (40%).

Development and characterization of photoprotective nanoemulsions containing Babassu (Orbignya phalerata Mart. ) lipophilic extract

Abstract Oil-in-water photoprotective nanoemulsions (NEs) were developed using Babassu (BBS) lipophilic extract, nonionic surfactants, and low concentrations of organic sunscreens by ultrasonic processing. BBS extract was chosen due to its suitable physicochemical properties (acidity index, peroxide index, refraction index, and relative density) and predominance of saturated fatty acids, identified by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), which promote biological activities and high oxidative stability. NEs were characterized by mean droplet size, morphology, polydispersity index (PdI), pH, and organoleptic properties, and the physical stability of the NEs was evaluated for 120 days at room temperature. The sun protection factor (SPF) was determined, and the photostability and in vitro cytotoxicity assays were performed for NEs. All NEs remained stable for 120 days, with a droplet size <150 nm and a monomodal distribution profile. The pH values were compatible with the skin's pH. NE3 showed a spherical morphology, with a mean droplet size of 125.15 ± 0.16 nm and PdI of 0.145 ± 0.032. NE3 containing BBS extract and sunscreens presented an SPF of 35.5 ± 3.0, was photostable after 6 h of radiation and was non-cytotoxic to fibroblast cells. Thus, NE3 could be considered a promising formulation for developing synergic plant-extract sunscreen photoprotective products for the market

Interações entre o relógio biológico e a sinalização do estado energético em plantas do complexo Saccharum / Biological clock and energy sensors in plants from Saccharum complex

A cana-de-açúcar e a cana energia são plantas intercruzáveis que compõe o complexo Saccharum. Estas plantas são fonte de biomassa para produção de açúcar, biocombustíveis, eletricidade, entre outros, e utilizam a energia assimilada pela fotossíntese de forma contrastante, ainda que ambas resultem em alta produtividade. O relógio biológico é um mecanismo molecular que gera informações sobre a hora do dia em conjunto com estímulos ambientais, adaptando respostas fisiológicas em prol de otimizar o desenvolvimento dos organismos em um ambiente cíclico, processo que regula cerca de 64% dos genes de cana-deaçúcar no campo. Em organismos sésseis como as plantas, o recorrente processo de produção de energia apenas durante o período luminoso, gera ritmos de metabólitos que influenciam na atividade de enzimas quinases que assim funcionam como sensores do estado energético, em vias conservadas nos eucariotos. Porém, pouco se sabe a respeito de como estes sinais são percebidos a nível transcricional, principalmente em plantas cultiváveis. Para elucidar como estas vias atuam em conjunto em plantas do complexo Saccharum, medimos o nível de transcrição de componentes do relógio biológico, de subunidades que compõe o complexo TOR, e da subunidade catalítica de SnRK1, KIN10. Medimos o desempenho do relógio biológico das variedades através da quantificação de amido em quatro pontos temporais, para obter uma dinâmica de produção e consumo, processo que é regulado pelo relógio biológico e tem genes com perfil de expressão rítmicos em cana de-açúcar. Curiosamente, uma das quatro variedades onde identificamos provável perfil rítmico de consumo de amido é a S.officinarum SP80-3280, cana-de-açúcar utilizada anteriormente para estudos de relógio biológico. Os nove acessos foram divididos em dois grupos com base em sua partição de carbono contrastante. HF (high fiber) com mais fibras e perfilho e grupo HS (high sucrose), com maior armazenamento de açúcares e amido que HF, em todos os horários de coleta, e com baixa produção de fibras. Estes grupos não diferem em expressão dos componentes de relógio biológico, no entanto, HS tem maior transcrição de uma subunidade do complexo TOR, em apenas um dos horários analisados (ZT12). Em conjunto, a expressão dos componentes do relógio biológico divide os acessos entre os que possuem altos níveis de transcrição de ScLHY, no ZT03, e os que possuem maior transcrição dos genes PRR59, 73 e 95, no ZT12, grupos com contrastante partição de carbono. A transcrição dos sensores energéticos se correlaciona no começo da noite em acessos de HS e Krakatau e, no começo da manhã, em acessos de HF e IN84-105, sem agrupar as variedades por espécie ou destino de carbono. Este trabalho sugere que há diferentes níveis de correlação entre a transcrição dos genes mensurados e as contrastantes partições de carbono das plantas do complexo Saccharu

Sugarcane and Energycane are intercrossable plants that make up the Saccharum complex. These plants are a source of biomass, sugar, biofuels, electricity among others, and even though they use the energy assimilated by photosynthesis in a contrasting way, both results in high productivity. The biological clock is a molecular mechanism that generates information about the time of day in conjunction with environmental stimuli, adapting physiological responses to optimize the development of organisms in a cyclic environment, a process that regulates about 64% of sugarcane genes in field-grown plants. In organisms such as plants, the recurrent process of energy production that happens only during the luminous period generates rhythmicity that may influence the activity of kinase enzymes, thus giving an energy sensor property for then. However, little is known about how these signs are perceived at the transcriptional level, especially in crops and monocots. To elucidate how these pathways act together in plants of the Saccharum complex, we measured the transcription level of the daytime loop of the biological clock, subunits that make up the TOR complex, and the catalytic subunit of SnRK1, KIN10. We measured starch content in four time points, to obtain a dynamic of production and consumption, a process that is regulated by the biological clock and has genes with a rhythmic expression profile in sugarcane. Interestingly, one of the four varieties where we could identify a probable rhythmic profile of starch consumption is a sugarcane SP80-3280 (S. officinarum), that have been used for biological clock studies. The nine genotypes were divided into two groups based on their contrasting carbon partition. HF (high fiber) with more fiber and tiller and group HS (high sucrose), with higher sugar and starch storage than HF, but with lower fiber production. These groups do not differ in expression of biological clock components; however, HS has a higher transcription of a subunit of the TOR complex, in only one of the analyzed times (ZT12). Together, the expression of components of the biological clock divides the genotypes between those with higher levels of ScLHY in ZT03 and those with more transcripts of PRR59, 73 and 95 genes in ZT12, groups that also have contrasting carbon partition. The transcription of TOR complex correlates in the early evening in HS and KRAKATAU, but in the morning, in HF and IN84-105, with no clear correlation with the C destination preferences. This work suggests that there are different levels of correlation between the transcription of biological clock and energy sensors component genes and the contrasting carbon partitions of plants from the Saccharum complex

Caracterização de cereja-do-rio grande (Eugenia involucrata DC. ) e grumixama (Eugenia brasiliensis LAM. ), frutos nativos da Mata Atlântica, quanto a compostos voláteis e precursores / Volatile compounds and precursors characterization of the Grumixama (Eugenia brasiliensis LAM. ) and Cereja-do-Rio-Grande (Eugenia involucrata DC. ), atlantic forest native fruits

Mesmo reduzida e fragmentada, o vasto bioma da Mata Atlântica abriga milhares de plantas. Como destaque, tem-se as espécies frutíferas, aos quais podem ser atribuídas um importante valor para a segurança alimentar, nutricional e sociocultural. Entre elas, têm-se a cereja-do-rio grande (Eugenia involucrata DC.) e a grumixama (Eugenia brasiliensis Lam.), caracterizadas pela polpa de sabor doce-acidulado, sendo muito apreciadas e utilizadas tanto in natura, quanto no preparo de doces, xaropes, licores e geleias. Uma das características determinantes para o sucesso e aceitação destes frutos pelo consumidor, são os atributos de qualidade sensorial. As propriedades aromáticas dos frutos dependem da potência individual dos voláteis e a concentração de cada um, bem como a combinação com outros compostos. Todavia, apesar do grande potencial de mercado, devido às características nutricionais, fitoterápicas, potencial funcional e ao sabor exótico, os plantios existentes destas são oriundos de multiplicação por sementes, resultando em plantas desuniformes quanto as características de produção e qualidade. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo identificar metabólitos voláteis que confiram características sensoriais desejáveis aos frutos. Auxiliando na identificação de plantas que produzem frutos com voláteis de interesse para o sabor, o que permitirá a clonagem e propagação de plantas com homogeneidade na produção. Os compostos voláteis foram analisados em triplicata, de acordo com o método de microextração em fase sólida (SPME, do inglês Solid Phase Microextraction). Os resultados mostraram que os grupos de frutos das diversas regiões se diferenciaram quanto a composição dos metabolitos voláteis, bem como na abundância destes compostos. Observou-se também uma variação de composição entre as árvores da mesma região demonstrando tal irregularidade ocasionada pela propagação por sementes. A maioria de compostos voláteis produzidos foram identificados como terpenos, sendo estes já conhecidos pela importância no flavor em frutos. Desta forma, conhecer o aroma fornecerá um conjunto de dados que são subsídios para outros pesquisadores trabalharem em suas diversas áreas buscando características necessárias para o sucesso da comercialização, ocasionando no incentivo ao cultivo e valorização da riqueza nacional, no âmbito das espécies frutíferas, com vistas à proteção ambiental e em defesa da biodiversidade brasileira

The Atlantic Forest harbors thousands of plants despite of its reduced and fragmented character. It is important to highlight the fruit species which hold attributed and important value for food and socio-cultural security. Among them, there are the big cherry (Eugenia involucrata DC.) And the grumixama (Eugenia brasiliensis Lam.), fruit with sweet-acidulated flavor, which is much appreciated and used in the preparation of sweets, syrups, liqueurs, and jellies. One of the determining characteristics for the success and acceptance of these fruits by the consumer are the attributes of sensorial quality. The aromatic properties of the fruits depend on the individual potency of the volatiles and the concentration in each one of them, as well as the combination with other compounds. Despite of the great market potential due to the nutritional, phytotherapic and exotic flavor characteristics, the existing plantations of these fruits are originated from seed multiplication, resulting on uneven plants in terms of production and quality characteristics. In this sense, the presented work below was aimed to identify volatile metabolites that confer desirable sensorial characteristics to the fruits. The volatile compounds were analyzed in triplicate according to the Solid Phase Microextraction (SPME) method. The results showed that the fruit groups from different regions differed in terms of the composition of volatile metabolites, as well as in the abundance of these compounds. There was also a variation of composition among the trees of the same region which demonstrated such heterogeneity caused by seed propagation. Most volatile compounds produced were identified as terpenes which are known for playing an important role in the flavor of fruits. In this way, by knowing the aroma, a set of data will be provided and used as an allowance for other researchers who are working in the various areas related to the pursue of the necessary characteristics for the commercial success, resulting on the motivation to cultivate and value the forest

Evaluation of the antibacterial synergism of two plant extracts belonging to Bignoniaceae family and development of a topical formulation

Abstract Fridericia caudigera and Cuspidaria convoluta (Bignoniaceae) species, which grow in the northwest of Argentina, have shown antibacterial effect against strains isolated from skin infections, and each one displayed synergism with commercial antibiotics. The aims of this work were to evaluate the antibacterial activity and toxicity of the combination of these two plant species, and to design a stable gel for topical use including the blend of extracts. The combination of extracts was evaluated for synergistic effects (chequerboard assay), genotoxicity (Ames test) and cytotoxicity (Artemia salina test). A gel was subsequently formulated with the combination of extracts using carboxymethylcellulose as a polymer. The following physico- chemical characteristics of the gel formulation: pH, viscosity, spreadability and total phenol content, as well as resistance to severe temperature changes, biological activity (diffusion in agar), in vitro permeation (Franz cells) and primary dermal irritation (Draize test) were analyzed. The combination of extracts showed a synergistic effect on pathogenic bacteria and was not toxic in the in vitro tests. The gel was stable and retained the antimicrobial activity of the original extracts. The formulation proposed in this work could constitute an alternative for primary skin infections since it proved to be safe for topical administration.

Synthesis and characterization of Sophora alopecuroides L. green synthesized of Ag nanoparticles for the antioxidant, antimicrobial and DNA damage prevention activity

Abstract In this study, it was aimed to investigate the amount of antioxidant, protective properties against DNA damage and antibacterial properties against various pathogens after the interaction of Ag metal (Ag NPs/Sa) of Sophora alopecuroides L. (S. alopecuroides L) plant seed, which is grown in Igdir and used in the treatment of many diseases. The DPPH radical quenching activity of Ag NPs/Sa was performed by using Blois method, DNA damage prevention activity by gel electrophoresis and antibacterial property by disk diffusion method. With the green synthesis method, AgNPs obtained as a result of the reaction of the plant and Ag metal are UV visible spectrophotometer (UV-vis), fourier-transformed infrared spectroscopy (FT-IR), X-ray diffraction (XRD) and scanning electron microscope (SEM). DPPH radical quenching activity of Ag NPs/Sa was investigated in the concentration range of 25-250 µg/ml. The radical quenching activity at a concentration of 250 µg/ml was 85,215 ± 0,101%, while this value was 93,018% for the positive control BHA. It has been observed that the protective property of pBR322 plasmid DNA damage against OH radicals originating from H2O2 increases with concentration. It has been observed that Ag NPs/Sa has significant antimicrobial properties against some pathogens (B. subtilis ATCC 6633 E. coli ATCC 25952, B. cereus ATCC 10876, P. aeruginosa ATCC 27853, E. faecalis ATCC 29212, S. aureus ATTC 29213 and C. albicans ATTC 90028) that cause disease and even some pathogens are more effective than antibiotics

Effect of vegetable by-products on folate production by starter and probiotic microorganisms to develop a bio-enriched fermented soy product / Efeito de subprodutos vegetais na produção de folatos por microrganismos starter e probióticos para o desenvolvimento de um produto de soja fermentado bioenriquecido

However, folate production was strain-dependent and also dependent on the environmental conditions and on the vegetable substrate used. Passion fruit by-product presented the lowest folate concentration and was selected for the following experiments. Thus, the impact of the supplementation of soymilk with passion fruit by-product and/or commercial prebiotic fructooligosaccharides FOS P95 on the folate production by three St. thermophilus strains, as well as four probiotic Lactobacillus strains (LA-5, LGG, PCC, and RC-14) were evaluated. St. thermophilus ST-M6 and TH-4 produced the highest amounts of folate in all fermented soymilks. The concentration of the vitamin was also high when these strains grew in co-culture with LA-5 and LGG. Soymilk supplemented with both passion fruit by-product and FOS together presented the highest concentration of folate when fermented by the co-culture TH-4+LGG. This co-culture was selected to produce four fermented soy products (FSP). All FSP were bio-enriched with folate produced by the co-culture and the probiotic strain LGG remained always above 8 log CFU/mL until the end of the storage period (28 days at 4ºC). In contrast, the concentration of the vitamin was stable until day 14 then a slight decrease was observed at the end of the storage period. The FSP supplemented with both passion fruit by-product and FOS together may contribute with around 14% of the recommended daily intake for folate if consumed until day 14 of storage. During the in vitro simulated gastrointestinal conditions, the folate content of the digested FSP increased from 1.3 to 3.6-fold, especially at the small and large intestinal in vitro phases and the strain LGG was recovered. In contrast, St. thermophilus TH-4 was not recovered during the assay. Finally, the prebiotic potential of the bioactive compounds present in the fruit by-products was characterized. Fruit by-product water extracts (FWE) containing soluble fibres from fruit by-products were obtained through a hot-water extraction and were associated to phenolic compounds and showed antioxidant activity. The FWE (especially, orange and mango water extracts) presented an anti-inflammatory potential by decreasing the nitric oxide concentration produced in vitro by macrophages stimulated with lipopolisaccharides (LPS) from Salmonella Thyphymurium. The FWE (especially from mango) were able to stimulate the growth of the strains TH-4 and LGG, as well the folate production by these microorganisms when tested individually and in co-culture. The FWE also increased the adhesion of TH-4 and LGG to Caco-2 cells in an in vitro model. These results suggest a prebiotic potential of the fruit by-products evaluated and their potential towards increased folate production by the selected microorganisms. Therefore, the bio-enrichment of fermented soy products with folate produced by beneficial microorganisms is an alternative for the development of functional foods with high folate content. Additionally, fermentable bioactive compounds with functional and/or biological activity, such as soluble fibres associated to phenolic compounds with antioxidant activity, present in the fruit by-products, may act as potential prebiotic ingredients. These bioactive molecules may represent a potential natural alternative to synthetic drugs for the treatment of inflammatory processes

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de subprodutos vegetais, incluindo subprodutos do processamento de fruta (maracujá, laranja, acerola e manga) e de soja (okara) na produção de folatos de novo por microrganismos strater e probióticos para bioenriquecer um produto de soja fermentado. Na primeira etapa deste trabalho, o impacto da farinha de amaranto na produção de folatos pelos microrganismos também foi avaliado. Neste sentido, primeiramente, verificou-se o efeito desses subprodutos vegetais e da farinha de amaranto na capacidade de três cepas starter - Streptococcus thermophilus (ST-M6, TH-4 e TA-40) e 10 cepas probióticas (Lactobacillus (Lb.) acidophilus LA-5, Lb. fermentum PCC, Lb. reuteri RC-14, Lb. paracasei subsp. paracasei Lb. casei 431, Lb. paracasei subsp. paracasei F19, Lb. rhamnosus GR-1, and Lb. rhamnosus LGG, Bifidobacterium (B.) animalis subsp. lactis BB-12, B. longum subsp. longum BB-46, e B. longum subsp. infantis BB-02) em produzir folato utilizando um caldo MRS modificado. A maior parte dos microrganismos testados foi capaz de produzir folato. Entretanto, a produção foi considerada cepa-dependente e, também, dependente das condições ambientais e do tipo de subproduto vegetal empregado. O subproduto de maracujá apresentou a menor concentração de folato e, por isso, foi selecionado para os testes seguintes. Neste sentido, o impacto da suplementação do leite de soja com subproduto de maracujá e/ou com o prebiótico comercial fruto-oligosacarídeo FOS P95 na produção de folato pelas três cepas de St. thermophilus, bem como quarto cepas probióticas do gênero Lactobacillus (LA-5, LGG, PCC e RC-14), também foi avaliado. Em cultura pura, as cepas de St. thermophilus ST-M6 e TH-4 produziram grande quantidade de folato nas formulações de extrato de soja fermentados. A concentração da vitamina foi maior quando tais cepas se desenvolveram em co-cultura com LA-5 e LGG. Observou-se que o extrato de soja suplementado concomitantemente com subproduto de maracujá e FOS apresentou a maior quantidade de folato quando fermentado pela co-cultura TH-4+LGG. Esta co-cultura, portanto, foi selecionada para desenvolver os produtos fermentados de soja (PFS). Todas as formulações foram bioenriquecidas e a cepa LGG manteve-se viável por todo o período de armazenamento (28 dias a 4ºC). Entretanto, a concentração da vitamina manteve-se estável apenas até o dia 14, observando-se uma diminuição da quantidade de folato ao final do período de armazenamento. Constatou-se que o produto fermentado de soja suplementado concomitantemente com subproduto de maracujá e FOS pode contribuir com cerca de 14% da ingestão diária recomendada para folato se consumido até o dia 14 do armazenamento. Além disso, durante a simulação gastrointestinal in vitro, observou-se que a digestão aumentou de 1,3 a 3,6 vezes a concentração da vitamina incrementando, consideravelmente, a bioacessibilidade do folato, principalmente nas porções simuladas do intestino delgado e grosso do intestino e a cepa LGG foi recuperada. Entretanto, a cepa St. thermophilus TH-4 não foi recuperada durante o ensaio. Por fim, o potencial prebiótico de componentes bioativos presentes nos subprodutos de fruta foi caracterizado. Uma extração Hot Water foi conduzida, a fim de obter extratos aquosos de subprodutos de fruta ricos em fibras solúveis associadas a compostos fenólicos com atividade antioxidante. Observou-se, ainda, que tais extratos aquosos de subprodutos de fruta (laranja e manga) apresentaram potencial anti-inflamatório constatado pela diminuição da concentração de óxido nítrico produzido por macrófagos estimulados com lipopolissacarideo (LPS) de Salmonella Typhymurium in vitro. Além disso, os extratos aquosos de subprodutos de fruta (principalmente o extrato aquoso de subproduto de manga) foram capazes de estimular a multiplicação das cepas TH-4 e LGG, bem como a produção de folatos por estes microrganismos quando avaliados individualmente e em co-cultura. Adicionalmente, esses extratos aquosos de subprodutos de fruta aumentaram a adesao do TH-4 e do LGG a células Caco-2 em modelo in vitro. Neste sentido, os resultados sugerem um potencial prebiótico dos subprodutos de fruta testados, de modo a estimular, não somente o desenvolvimento dos microrganismos avaliados mas, principalmente, o potencial destes em produzir folatos na presença dos substratos vegetais testados. O bioenriquecimento dos produtos fermentados de soja com folatos produzidos por microrganismos benéficos emerge como alternativa de alimento potencialmente funcional com alto teor de folato. Adicionalmente, compostos bioativos fermentescíveis e com atividade biológica como, por exemplo, as fibras solúveis associadas a compostos fenólicos com atividade antioxidante, presentes nos subprodutos de fruta testados podem constituir potenciais ingredientes prebióticos, além de representarem uma possível alternativa natural para o tratamento de processos inflamatórios

Alimento ou medicamento?: Espécies vegetais frente à legislação brasileira / Food or medicine?: Plant species in relation to the Brazilian legislation

O uso de espécies vegetais como fonte terapêutica e alimentícia tem apresentado significativo crescimento nos últimos anos, em especial no território brasileiro que é dotado de grande biodiversidade. A regulamentação dessas categorias de produtos envolve uma vasta lista de legislações, o que gera dificuldades no entendimento regulatório. Este trabalho teve por objetivo diferenciar algumas das classes de alimentos e medicamentos baseados em espécies vegetais e expor as legislações pertinentes a cada caso. Foi realizado um levantamento bibliográfico e documental com base no acervo regulatório brasileiro atual e os principais dados foram compilados em forma de tabela. Este trabalho permitiu visualizar uma parte do universo legal referente aos produtos de origem vegetal, o que é essencial para o enquadramento correto dessas espécies frente a legislação, bem como seu comércio, propaganda e uso regular e seguro. Isto é fundamental frente à valorização emergente das espécies vegetais dentro do sistema público de saúde brasileiro de acordo com as exigências regulatórias de cada categoria.

The use of plant species as food and therapy source has shown significant growth in recent years, particularly in the Brazilian territory that is endowed with rich biodiversity. The regulation of these product categories, however, involves a wide range of legislation, which creates difficulties in regulatory understanding. This study aimed to differentiate some of the classes of food and medicines based on plant species and expose the laws pertaining to each case. We conducted a literature review and documentary based on the current Brazilian regulatory collection and the most important data were compiled in tabular form. This work allowed us to visualize a part of the legal universe for products of plant origin, which is essential for the adequate framing of these species in the legislation, as well their regular and safe trade, marketing and use. This is necessary because of the major regulations and requirements for food and medication categories and the emerging appreciation of plant species on the Brazilian public health system.

Effect of precursors feeding and media manipulation on production of novel anticancer pro-drug camptothecin from endophytic fungus

We have established methodology for the isolation and characterization of a novel endophytic fungus from the inner bark of medicinal plant Nothapodytes foetida, which produced camptothecin in Sabouraud broth (SB) under shake flask conditions. Camptothecin and its related compounds are at present obtained by extraction from intact plants, but fungal endopytes may be an alternative source of production. In present study we have observed the effect of different nutrient combinations and precursors (tryptophan, tryptamine, geraniol, citral, mevalonic acid and leucine) on the accumulation of camptothecin by endophytic fungus Entrophospora infrequens. The precursors were fed either alone or in combinations (tryptophan and geraniol, tryptophan and citral, tryptophan and mevalonic acid, tryptophan and leucine). The highest camptothecin content was observed in the range of 503 ± 25µg/100g dry cell mass in Sabouraud medium. Camptothecin content in the medium was increased by 2.5 folds by the presence of tryptophan and leucine whereas the production with trytophan was also significantly different from other treatments. Furthermore, the effect of fungal camptothecin on the morphology of human cancer cell lines was also studied. The treated cells showed reduction in size, condensation of nucleus and the protoplasmic extensions were reduced. All these characteristics are found in apoptotic cells.

Suplementação de glutamina em dietas elaboradas com ingredientes de origem vegetal e animal para pintos de corte / Supplementation of glutamine in diets with ingredients from animal and vegetable sources for broiler chicks

Foi avaliado o efeito da suplementação da glutamina em dietas contendo ingredientes de origem animal sobre o desempenho e a integridade intestinal de pintos de corte, criados até 21 dias de idade. Os tratamentos constituíram-se de combinações entre tipos de dieta, com ingredientes de origem vegetal ou vegetal+animal e suplementação de glutamina (0,0; 0,5; 1,0 e 2,0%). O delineamento foi em blocos ao acaso em arranjo fatorial 2x4, tipos de ração x percentagem de glutamina, com cinco repetições e 12 pintos por unidade experimental. Não houve efeito da interação tipo de dieta versus suplementação de glutamina sobre o desempenho, e os tratamentos não influenciaram o desempenho de pintos de corte. Houve efeito quadrático da suplementação de glutamina sobre o coeficiente de digestibilidade da proteína bruta. A suplementação com glutamina aumentou altura de vilos e profundidade de cripta no duodeno. A utilização de produtos de origem animal em dietas para pintos na fase inicial não prejudica o desempenho, e a inclusão de glutamina melhora a integridade intestinal.

The effect of glutamine supplementation in diets formulated with animal by-products on the performance and integrity of the small intestine of broiler chicks up to 21 days of age was evaluated. The treatments were the combination of types of diets (only with ingredients from a vegetal source or vegetal plus animal source) and levels of glutamine (0.0; 0.5; 1.0 and 2.0%). The experimental design was randomized blocks in a 2x4 factorial scheme (kinds of diets x levels of glutamine), with five replicates and 12 birds per experimental unit. No interaction between diets and glutamine supplementation and treatment effects on the performance traits were observed during the chick starter phase. There was a quadratic effect of glutamine on the crude protein digestibility coefficient. Birds supplemented with glutamine diets showed higher villus height and crypt depth in the duodenum. Broiler diets formulated with animal ingredients have no effect on chick performance during the initial phase, and glutamine supplementation improved the small intestine integrity.

Dermatoses provocadas por plantas (fitodermatoses) / Dermatosis due to plants (phytodermatosis)

As dermatoses causadas por plantas são relativamente comuns no nosso meio e podem ocorrer por diversos mecanismos patogênicos. São descritas dermatoses por trauma físico, por ação farmacológica, mediadas por IgE, por irritação, por ação conjunta da luz e por sensibilização. Também são descritas na introdução desta revisão as pseudofitodermatoses causadas por elementos veiculados pelas plantas e, por isso, aparentemente causadas pelas plantas.

Dermatosis caused by plants is relatively common and may occur by various pathogenic mechanisms. Dermatitis due to physical trauma, pharmacological action, irritation, sensitization, mediated by IgE and induced by light are described. Pseudophytodermatosis caused by plant-delivered elements is also described in the introduction to this work.

Caracterização da bacteriocina produzida por Lactococcus lactis subsp. lactis MK02R isolado de rúcula (Euruca sativa Mill.) e avaliação do seu potencial probiótico utilizando o modelo dinâmico TIM-1 / Characterization of the bacteriocin produced by Lactococcus lactis subsp. lactis isolated MK02R rocket salad (Euruca sativa Mill.) and evaluation of its potential probiotic using the dynamic model TIM-1

Após a constatação da escassez de estudos realizados com vegetais crus na busca por novas estirpes de bactérias láticas (BAL) produtoras de bacteriocinas e diante do potencial tecnológico da aplicação destas cepas tanto como agentes de conservação em alimento, bem como cultura probiótica em alimentos funcionais, este estudo objetivou isolar e identificar cepas de bactérias láticas potencialmente bacteriocinogênicas de amostras de rúcula obtidas no comércio local de São Paulo, SP - Brasil, identificar e caracterizar as bacteriocinas produzidas pelos isolados e avaliar o potencial probiótico dos isolados testando sua sobrevivência no modelo dinâmico do trato gastrointestinal TNO gastro-Intestinal Model - TIM-1 disponível no TNO (The Netherlands Organization for Applied Scientific Research) divisão Quality of Life (Zeist, Holanda). A produção de bacteriocinas neste modelo também foi avaliada, comparando-se com L. sakei 2a, também produtora de bacteriocinas e ainda avaliou-se a interferência na viabilidade de E. faecium LMA1. A cepa Lactococcus lactis subsp. lactis MK02R de rúcula produziu uma bacteriocina sensível à enzimas proteolíticas, termoestável e não influenciada pelo pH, sendo capaz de inibir Enterococcus faecium, Lactobacillus sakei, Listeria innocua, Lactobacillus delbrueckii e Listeria Monocytogenes de diferentes grupos sorológicos. Os ensaios genéticos utilizando primers Nisf e Nisr confirmaram que a bacteriocina MK02R é uma nisina, apresentando uma alteração dos aminoácidos no peptídeo líder em relação às nisinas A, Z, Q, F e U, porém com a estrutura do peptídeo maduro idêntica ao da nisina F. Estes resultados foram confirmados por espectrometria de massas de amostras purificadas por HPLC. L. lactis MK02R resistiu à passagem no modelo dinâmico TIM-1, apresentando uma alta capacidade de sobreviver nas condições simuladas do trato gastrointestinal humano. Entretanto, não foi capaz de causar a redução no número de E. faecium LMA1. Em contrapartida, L. sakei 2a, mesmo apresentando uma sobrevivência menor, foi capaz de causar uma redução de 70% na população de E. faecium LMA1 no ambiente simulado do TGI. Não foi detectada atividade residual da ação antimicrobiana das bacteriocinas produzidas por L. lactis MK02R ou L. sakei 2a após a passagem pelo modelo dinâmico TIM-1. Estes resultados evidenciam a possível aplicação de L. lactis MK02R como um agente de controle biológico na conservação de alimentos e também como uma cultura potencialmente probiótica

Given the scarcity of studies performed with raw vegetables addressing the search for new bacteriocinogenic strains of lactic acid bacteria (LAB) and considering the technological application of these strains as food preservatives and probiotic cultures in functional foods, this study was aimed at isolation and identification of bacteriocinogenic LAB strains from samples of rocket salad obtained in the local market of São Paulo, SP - Brazil, subsequent characterization of the bacteriocins produced by these LABs and evaluation of their probiotic potential by testing their survival in the dynamic gastrointestinal model TNO gastro- Intestinal-Model - TIM-1, available at the TNO (Netherlands Organization for Applied Scientific Research) Quality of Life division (Zeist, Netherlands). The studies in the TIM-1 model were also done with another bacteriocinogenic strain L. sakei 2a for comparison, evaluating their interference on the viability of E. faecium LMA1. The bacteriocin produced by strain Lactococcus lactis subsp. lactis MK02R isolated from rocket salad was sensitive to proteolytic enzymes, heat-stable and not influenced by the pH. The bacteriocin inhibited the growth of Enterococcus faecium, Lactobacillus sakei, Listeria innocua, Lactobacillus delbrueckii the primers Nisf and Nisr indicated that the bacteriocin produced by the strain MK02R is a nisin, with a change in the amino acid sequence of the leader peptide when compared to nisin A, Z, Q, U and F, but with the structure of the mature peptide homologous to that of nisin F. These results were confirmed by mass spectrometry of purified samples obtained by HPLC. L. lactis MK02R withstood the test in the dynamic model TIM-1, presenting capability to survive in the simulated conditions of the human gastrointestinal tract. However, the strain was not able to cause a reduction in the number of E. faecium LMA1. On the other hand, L. sakei 2a, even presenting lower survival, was able to cause 70% reduction in the population of E. faecium LMA1 in the gut simulated environment. No residual antimicrobial activity of bacteriocin produced by L. lactis MK02R or L. sakei 2a was detected after the transit through the dynamic model TIM-1. These results demonstrate the possible application of L. lactis MK02R both as a biocontrol agent in food preservation and as a potentially probiotic culture

Os vícios de 'comer coca' e da 'borracheira' no mundo andino do cronista indígena Guaman Poma / The vices of eating cocaine and of the 'borracheira' in the Andean world of the aboriginal cronicler Guaman Poma

A coca surge, na crônica-carta de Guaman Poma de Ayala ao rei da Espanha, a partir de peculiares eventos da história do Peru. Na visão do escritor indígena e cristão (entre os sécs. XVI e XVII), a planta psicoativa aparece num passado não muito distante, por meio dos índios da montaña (as serras orientais cobertas pela selva quevem da planície amazônica), numa história de idolatria do arbusto. Mas o vício de mastigar a folha da coca é inventado pelos incas na conquista dessa região (o Antisuyo). A história de Guaman Poma pode entreter, mas também demonstra a seriedade do cronista em apontar para a relação entre os vícios mundanos com umgrande pecado, a idolatria de alguns índios – mas são exceções para o fato, segundo o cronista, da verdadeira cristandade desde muito tempo na serra (nas altitudes mais temperadas), que recebe de fora o “vício de comer coca”. É interessante notar que essas histórias de Guaman Poma também indicam códigos indígenas de compreensão e manipulação dos eventos, como será discutido abaixo, com apoio, ainda, da análise da crônica de outro indígena do Peru, e contemporâneo, Santa Cruz Pachacuti.

Coccidae, Pseudococcidae, Ortheziidae, and Monophlebidae (Hemiptera: Coccoidea) of Espírito Santo, Brazil / Coccidae, Pseudococcidae, Ortheziidae, e Monophlebidae (Hemiptera: Coccoidea) do Espírito Santo, Brasil

New plant hosts are recorded for nine scale insect species recently collected in Espírito Santo, Brazil, and eleven scale insect species are recorded for the first time from the state: Ceroplastes floridensis Comstock, Coccus longulus (Douglas), Coccus viridis (Green), Eucalymnatus tesselatus (Signoret), Pseudokermes sp., Saissetia coffeae (Walker), Phenacoccus madeirensis Green, Pseudococcus jackbeardsleyi Gimpel & Miller, Pseudococcus longispinus (Targioni Tozzetti), Icerya purchasi Maskell, and Icerya genistae Hempel. This is also the first record of Co. longulus in Brazil. Information on the host plants and geographic distribution of the 26 species of scale insects of the families Coccidae, Pseudococcidae, Ortheziidae, and Monophlebidae, currently known from Espírito Santo is provided.

Novas plantas hospedeiras foram registradas para nove espécies de cochonilhas coletadas recentemente no Estado do Espírito Santo, Brasil, e onze espécies de cochonilhas são registradas pela primeira vez no Estado: Ceroplastes floridensis Comstock, Coccus longulus (Douglas), Coccus viridis (Green), Eucalymnatus tesselatus (Signoret), Pseudokermes sp., Saissetia coffeae (Walker), Phenacoccus madeirensis Green, Pseudococcus jackbeardsleyi Gimpel & Miller, Pseudococcus longispinus (Targioni Tozzetti), Icerya purchasi Maskell, e Icerya genistae Hempel. Co. longulus é registrada pela primeira vez no Brasil. É disponibilizada a informação das plantas hospedeiras e a distribuição geográfica de 26 espécies de cochonilhas das famílias Coccidae, Pseudococcidae, Ortheziidae, e Monophlebidae atualmente conhecidas no Estado do Espírito Santo.

Efectos de la temperatura sobre el crecimiento individual y formación de zooides en Stylaria lacustris (Linnaeus, 1767) (Oligochaeta, Naididae) / Temperature effects on individual growth and zooids formation in Stylaria lacustris (Linnaeus, 1767) (Oligochaeta, Naididae)

Los cultivos realizados con S. lacustris demostraron que la temperatura juega un papel de importancia en la tasa de la reproducción, en cuanto al número de zooides producido por individuo así como también al tamaño alcanzado por los mismos. Por otro lado, regularía la tasa de crecimiento y la reproducción sexual, dando lugar a la madurez de los individuos cuando aumenta la temperatura. El tiempo de vida promedio de los individuos inmaduros se estimó en 15 días, siendo este valor independiente de la temperatura utilizada en los cultivos. Los individuos maduros vivieron en promedio 37 días. La supervivencia en S. lacustris fue decreciendo gradualmente, según una curva de tipo lll. La expectativa de vida presentó su pico a la edad de 16 días y se mantuvo aproximadamente constante hasta una edad de 28 días a partir de la cual fue decreciendo en forma persistente hasta la última edad alcanzada. Se estimó el crecimiento individual, según la ecuación de von Bertalanffy, para los organismos mantenidos a 23 ± 2 ºC y a 14 ± 1 ºC. En aquellos individuos cultivados a mayor temperatura se registró una mayor talla, aunque su tasa de crecimiento fue menor que la de los individuos mantenidos a 14 ºC.

The experiments carried out with S. lacustris showed that the temperature plays a role of importance in the rate of asexual reproduction, as for the number of zooids produced by individual, as well as to the size reached by them. On the other hand, it would regulate the rate of growth and the sexual reproduction, giving place to the maturity of the individuals when temperature increases. The life time of the immature individuals was estimated in 15 days, being this independent of the temperature used in the cultures. The mature individuals lived on the average 37 days. The survival in S. lacustris was falling gradually, following a curve of type lll. Life expectancy presented its major value at the age of 16 days and stayed approximately constant up to an age of 28 days, after then falled persistently until the last reached age. The individual growth according to von Bertalanffy equation, was estimated for the organisms maintained at 23 ± 2 ºC and at 14 ± 1 ºC. Those individuals cultivated at higher temperature attained a bigger size, although their rate of growth was smaller than those maintained at 14 ºC.

Padrões ecológicos da comunidade de ácaros em euforbiáceas de um fragmento de mata estacional semidecidual, no Estado de São Paulo / Ecological patterns of the mite community on euphorbiaceous plants from a Semidecidual forest remnant in the State of São Paulo

Foi estudada a diversidade e a sazonalidade da comunidade de ácaros em três euforbiáceas nativas de um fragmento de mata estacional semidecidual, através de coletas mensais realizadas de maio de 2003 a abril de 2004. Foram aplicados índices descritores de diversidade, dominância e de equitatibilidade, para estudar os padrões ecológicos da comunidade, e a correlação linear de Pearson, para relacionar a abundância dos ácaros com a pluviosidade. Foram registrados 11.515 ácaros pertencentes a 111 espécies de 73 gêneros e 25 famílias. Dessas espécies, 44 por cento são generalistas enquanto que 21 e 35 por cento são fitófagas e predadoras, respectivamente. As fitófagas foram as mais abundantes, representando 45,7 por cento do material coletado, seguido pelas predadoras e generalistas, que constituíram 40,5 e 13,7 por cento dos espécimes amostrados, respectivamente. Phytoseiidae foi a família com a maior riqueza de espécies (23), seguida por Tarsonemidae (18) e Tydeidae (16). As três euforbiáceas estudadas apresentaram grande diversidade de espécies, pois os índices calculados foram superiores a 50 por cento da diversidade máxima teórica prevista. O padrão de abundância da comunidade foi igualmente descrito pelos padrões geométrico e logarítmico. Das três espécies de plantas estudadas, apenas Acalypha diversifolia apresentou potencial para utilização em programas de Manejo Integrado de Pragas.

The diversity and seasonality of mite community on three indigenous euphorbiaceous plants from a Semidecidual forest remnant were studied by means of monthly samplings performed from May 2003 to April 2004. Diversity, dominance and equitability indexes were applied in order to verify community ecological patterns, and the Pearson correlation coefficient was used to relate mite abundance with the rainfall. About 11,515 mites belonging to 111 species of 73 genera in 25 families were recorded. Among these species, 44 percent of them were generalists, while 21 and 35 percent are phytophagous and predatory, respectively. The phytophagous mites were the most abundant, performing 45.7 percent of mites collected, followed by the predatory and generalist species, which represented 40.5 and 13.7 percent of material sampled, respectively. The Phytoseiidae family showed the highest species richness (23), followed by Tarsonemidae (18) and Tydeidae (16). The three euphorbiaceous plants studied showed great species diversity, as the results of indexes were higher than 50 percent of theoretical maximum diversity. The species-abundance patterns determined for mite community was equally represented by geometric and log series models. Out of three plant species studied, only Acalypha diversifolia showed potential usage in Integrated Pest Management programs.

Effect of 3 plant extracts on b16-bl6 melanoma cell growth and metastasis in C57bl/6 mice

En el presente estudio, se investigaron los posibles efectos de extractos acuosos de tres plantas amazónicas, Uncaria tomentosa (UT), Petiveria alliacea (PA) y Phyllantus niruri (PN), sobre el crecimiento y la metástasis de células de melanoma B16/BL6 en ratones C57BL/6, y sobre los niveles séricos del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-iÀ), la interleucina-6 (IL-6) y el componente amiloide P (SAP). Ninguno de los tres extractos inhibió el crecimiento de las células B16/BL6, ni de las líneas celulares tumorales humanas, HT 29 y Caco-2, in vitro. Los niveles séricos de IL-6 y SAP, y la respuesta de TNF-¡À sérico a LPS resultaron elevados en los animales inoculados i.v. con las células de melanoma. Sólo el UT, inyectado i.p., redujo significativamente la metástasis a pulmón de un inóculo i.v. de células B16/BL6, y produjo un retardo en el crecimiento de un tumor primario. Además, sólo el extracto de UT produjo disminución de la respuesta sérica de las dos citocinas proinflamatorias, TNF-¡À e IL-6. UT amerita futuros estudios como potencial agente anticáncer.

Several useful anticancer drugs have been derived from plants. The growth and metastasis of tumours in the mousemay be used to study plant extracts with therapeutic potential. In the present study we investigated the possible effects of aqueous extracts of three Amazonian plants (Uncaria tomentosa [UT], Petiveria alliacea [PA] and Phyllantus niruri [PN]) on the growth and metastasis of B16/BL6 melanoma cells in the C57BL/6 mouse, and on the serum levels of tumor necrosis factor alpha (TNF-a), interleukin-6 (IL-6) and serum amyloid P component (SAP). None of the three extracts inhibited the growth of the B16/BL6 cells in vitro, or of two other tumor cell lines, HT-29 and Caco-2. Serum levels of IL-6 and SAP, and the TNF-¦Á serum response to LPS rose in the animals inoculated i.v. with melanoma cells. Only UT, when injected i.p. every other day for 14 days, was able to significantly reduce lung metastases after an i.v. inoculation of melanoma cells or to delay the appearance and growth of solid tumors after s.c. inoculation. In addition, only UT was able to reduce the serum response of the two proinflammatory cytokines, TNF-a and IL-6. No effect on SAP levels was observed. UT merits further study as an anticancer agent.

Pesquisa de micronúcleos na mucosa esofágica e sua relaçäo com fatores de risco ao câncer de esôfago / Research of micronuclei in the esophageal mucosa and its relationship with risk factors to esophagus cancer

Micronúcleos sao fragmentos de DNA nao incorporados ao núcleo na divisao celular e que apresentam relaçao com agentes genotóxicos (mutagênicos ou clastogênicos). Os micronúcleos podem ser detectados nas células esfoliadas dos tecidos. OBJETIVO: Determinar a freqüência de micronúcleos na mucosa esofágica, relacionando com determinados hábitos. PACIENTES E MÉTODOS: Em pacientes submetidos à endoscopia digestiva alta e sem evidências de anormalidades esofágicas, foram colhidos materiais através de escovado do esôfago médio, para pesquisa de micronúcleos. Após à endoscopia, os pacientes foram questionados sobre seus hábitos. RESULTADOS: A freqüência de micronúcleos nao mostrou diferenças significativas (p > 0,05) em relaçao ao sexo, local de residência (rural ou urbana), tipo de atendimento (ambulatorial ou hospitalizado), ingestao de álcool. Nas variáveis fumo e mate houve diferenças significativas entre as categorias expostos e ex-expostos em relaçao à categoria nunca expostos. CONCLUSAO: A freqüência de micronúcleos na mucosa esofágica foi maior nos pacientes fumantes e bebedores de mate